Лабораторные работы

Опыт 4.1. Изучение влияния концентрации фермента на гидролиз сахарозы, катализируемый сахаразой (инвертазой)

Материалы и оборудование

2%-ный раствор сахарозы
1-, 0,75- и 0,5%-ный растворы сахаразы (инвертазы)
Реактив Бенедикта
12 пробирок со штативом
Водяные бани с температурой 38 и 100°C
Стеклянные палочки
Таймер
Дистиллированная вода
Этикетки
Бунзеновская горелка

Методика

1. Добавьте 2 мл прозрачного синего реактива Бенедикта к 2 мл прозрачного бесцветного 1%-ного раствора сахаразы. Нагрейте смесь на водяной бане при 100 °С в течение 5 мин (реакция Бенедикта).

2. Повторите процедуру 1 с 2 мл прозрачного бесцветного 2%-ного раствора сахарозы, а затем с 2 мл дистиллированной воды.

3. 5 мл 1%-ного раствора сахаразы доведите до кипения.

4. В восемь чистых сухих пробирок с этикетками 1—8 налейте по 1 мл реактива Бенедикта.

5. Налейте 5 мл 2%-ного раствора сахарозы в пробирку с этикеткой S и поместите на водяную баню, в которой на протяжении всего эксперимента поддерживается температура 38 °С.

6. Налейте 5 мл 1%-ного раствора сахаразы в пробирку с этикеткой Е и поместите ее в водяную баню с температурой 38 °С.

7. Выдержите обе пробки вместе с их содержимым в водяной бане в течение 5 мин для того, чтобы они приобрели нужную температуру.

8. Добавьте раствор фермента к раствору сахарозы и переверните пробирку, чтобы хорошо перемешать эти два раствора.

9. Сразу же включите отсчет времени и вновь поставьте пробирку, содержащую реакционную смесь, в водяную баню.

10. В течение всего опыта непрерывно перемешивайте реакционную смесь.

11. После 30 с инкубации перенесите 1 мл смеси в пробирку 1.

12. С интервалом в 30 с отберите такие же пробы и перенесите их по очереди в пробирки 2—8.

13. Нагрейте пробирки 1—8 в водяной бане с температурой 100 °С в течение 5 мин. Отметьте время первого появления кирпично-красного осадка, свидетельствующего о положительной реакции на редуцирующий сахар.

14. Повторите тот же эксперимент, использовав на этот раз прокипяченый раствор фермента (см. п. 3).

15. Повторите всю последовательность процедур дважды: с 0,75%-ным и 0,5%-ным растворами сахаразы.

16. Запишите ваши наблюдения и объясните полученные результаты.

Литература. Биология : в 3 т. Т. 1 / Д. Тейлор, Н. Грин, У. Стаут ; под ред. Р. Сопера

AOF | 04.01.2021 13:29:50